1. 基本信息
英文名称：PKI (5-22) Amide；全称通常为 cAMP-Dependent Protein Kinase Inhibitor (5-22) Amide，也可表述为 Protein Kinase A Inhibitor Peptide (5-22) Amide 中文名称：环磷腺苷依赖性蛋白激酶抑制剂（5-22）酰胺；又称蛋白激酶 A 抑制剂肽（5-22）酰胺 CAS 号：100853-58-5 氨基酸序列：Thr-Thr-Tyr-Ala-Asp-Phe-Ile-Ala-Ser-Gly-Arg-Arg-Asn-Ala-Ile 单字母序列： TTYADFIASGRTGRRNAL 三字母序列：Thr-Thr-Tyr-Ala-Asp-Phe-Ile-Ala-Ser-Gly-Arg-Arg-Asn-Ala-Ile 分子量：经计算，其平均分子量约为 1969.17 g/mol（该数值基于各氨基酸残基的平均分子量及酰胺修饰的原子组成推算，不同计算方法可能存在 ±1 g/mol 的微小差异） 分子式：C84H137N29O26 等电点（pI）：约为 8.9-9.2，该数值由多肽序列中的碱性氨基酸（精氨酸，Arg，侧链 pKa 约 12.5）和酸性氨基酸（天冬氨酸，Asp，侧链 pKa 约 3.9）的电离平衡决定，通过等电点计算工具（如 ExPASy ProtParam）分析得出，实际测定值可能因实验条件略有波动 供应商：上海楚肽生物科技有限公司展开剩余80%2. 结构信息
PKI (5-22) Amide 是由 18 个氨基酸残基组成的线性多肽，末端氨基（N 端）为苏氨酸（Thr），末端羧基（C 端）经酰胺化修饰（-COOH 变为 -CONH₂），无环化结构或二硫键。其一级结构中，关键功能区域为中间的 “Arg-Ile-Val-Asp” 序列，该区域是与蛋白激酶 A（PKA）催化亚基结合的核心位点；二级结构以无规卷曲为主，在与 PKA 结合后可能发生局部构象变化（如形成短螺旋或 β- 转角），以增强与受体的相互作用。整体分子呈极性与非极性氨基酸交替分布的特征，N 端和中部的极性残基（如 Asp、Ser）参与氢键形成，中部及 C 端的非极性残基（如 Ile、Leu、Val）则通过疏水作用与 PKA 催化亚基的疏水口袋结合，共同维持其生物活性构象。
PKI (5-22) Amide结构式
3. 作用机理
PKI (5-22) Amide 是蛋白激酶 A（PKA，一种 cAMP 依赖性蛋白激酶）的特异性抑制剂，其作用机理主要依赖于与 PKA 催化亚基的竞争性结合：
竞争性结合抑制：PKA 的激活依赖于调节亚基与 cAMP 结合后释放催化亚基，游离的催化亚基可磷酸化下游底物（如 CREB 等转录因子）以传递信号。PKI (5-22) Amide 能模拟 PKA 天然底物的结构特征，优先与 PKA 催化亚基的活性中心结合，且结合亲和力远高于天然底物（解离常数 Ki 通常在纳摩尔级，~1-10 nM），从而竞争性阻断催化亚基与底物的结合，抑制其激酶活性。 构象锁定作用：结合后，PKI (5-22) Amide 的 C 端酰胺修饰及特定氨基酸残基（如 Leu、Ile）可与 PKA 催化亚基的疏水区域形成稳定疏水作用，同时 Arg 残基与催化亚基的酸性氨基酸侧链形成盐桥，进一步稳定复合物构象，使 PKA 催化亚基无法发生磷酸化底物所需的构象变化，持续抑制其功能。4. 研究进展
PKI (5-22) Amide 作为 PKA 的特异性工具肽，在细胞信号通路研究、疾病机制探索及药物研发中应用广泛，主要研究进展包括：
信号通路解析：在细胞生物学研究中，常用于特异性阻断 PKA 信号通路，以区分 PKA 与其他激酶（如 PKC、MAPK）的下游作用。例如，研究发现该多肽可抑制 cAMP 诱导的心肌细胞肥大，证明 PKA 在心肌肥厚信号通路中的正向调控作用；在神经细胞中，通过抑制 PKA 活性，揭示其在神经元分化、突触可塑性及学习记忆相关信号通路中的功能。 疾病机制研究：在肿瘤领域，研究表明部分肿瘤细胞（如肺癌、乳腺癌）的增殖依赖 PKA 信号激活，PKI (5-22) Amide 可通过抑制 PKA 活性显著降低肿瘤细胞的增殖速率，为探索 PKA 作为肿瘤治疗靶点提供了实验依据；在代谢疾病中，该多肽可调节胰岛 β 细胞中 PKA 介导的胰岛素分泌信号，为 2 型糖尿病的机制研究提供工具。 药物研发辅助：作为 PKA 抑制剂的原型肽，其结构为小分子 PKA 抑制剂的设计提供参考。例如，基于其核心结合序列 “Arg-Ile-Val-Asp”，研究人员开发出具有更高稳定性和细胞穿透性的模拟肽或小分子化合物，部分化合物已进入体外活性验证阶段。5. 溶解与保存
溶解方法：推荐优先使用无菌去离子水或磷酸盐缓冲液（PBS，pH 7.2-7.4）溶解，初始浓度可设定为 1-10 mg/mL，溶解时可轻轻涡旋震荡（避免剧烈搅拌导致多肽变性），若出现轻微不溶，可在 37℃水浴中温和孵育 5-10 分钟辅助溶解；若需在有机相体系中使用，可先用少量二甲基亚砜（DMSO，浓度不超过 5%）助溶，再用实验缓冲液稀释至目标浓度（高浓度 DMSO 可能影响多肽活性及细胞活性，需避免）。 保存条件： 粉末状态：在 - 20℃或 - 80℃密封避光保存，避免反复冻融（建议分装后保存），保质期通常为 2-3 年（未开封且保存得当）。 溶液状态：溶解后的多肽溶液需现配现用；若需短期保存（1-2 周），可分装为单次使用剂量，置于 4℃冰箱避光保存；若需长期保存（1 个月以上），需将溶液分装后置于 - 20℃或 - 80℃冷冻保存，且冻融次数不超过 3 次（反复冻融会导致多肽聚集，降低活性）。 注意事项：保存过程中需避免接触强酸、强碱及氧化剂，以防多肽降解；解冻后的溶液若出现浑浊或沉淀，提示多肽可能已变性，不宜继续使用。6. 相关多肽
PKI (5-22) Amide 属于 PKA 抑制剂肽家族，其相关多肽主要为 PKI 蛋白的其他活性片段或修饰衍生物，核心功能均为调节 PKA 活性，具体包括：
PKI(6-22) Amide：与 PKI (5-22) Amide 相比，缺失 N 端第 5 位的苏氨酸（Thr），仍保留核心结合序列，对 PKA 的抑制活性略低于 PKI (5-22) Amide（Ki 约 10-20 nM），常用于研究 N 端 Thr 对抑制活性的影响。 PKI(5-24) Amide：在 PKI (5-22) Amide 的 C 端增加 2 个氨基酸残基（通常为 Gly-Leu），分子量略大（约 2100 g/mol），与 PKA 的结合稳定性增强，适用于需长期抑制 PKA 活性的实验场景。 Fluorescein-PKI(5-22) Amide：在 PKI (5-22) Amide 的 N 端或特定赖氨酸残基上标记荧光素（Fluorescein），可通过荧光成像技术追踪多肽在细胞内的定位及与 PKA 的结合动态，常用于活细胞水平的 PKA 信号可视化研究。 TAT-PKI(5-22) Amide：将 HIV-TAT 蛋白的细胞穿透序列（如 YGRKKRRQRRR）与 PKI (5-22) Amide 融合，增强多肽的细胞穿透能力，适用于无法通过常规转染导入多肽的细胞模型（如原代细胞、神经细胞）。发布于：上海市佳成网配资-配资公司排行榜-配资官网-配资门户网官网提示：文章来自网络，不代表本站观点。
